厭氧培養箱進行厭氧培養的具體步驟如下：
按使用要求放置好必要的附件和器具。
通電源開照明燈，開溫控儀，調節所需溫度。
操作室內放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示紙（封閉）。
關緊取樣室內外門，并抽真空校驗。
操作室內置換（氮氣置換）：把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊，充氮氣。
操作室第二次置換（氮氣置換）：重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續三次氮氣置換。
操作室第四次置換（混合氣體置換）：調換氣路打開混合氣閥3進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關開閉排氣。
操作室內打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后打開美蘭指示紙觀察其變色情況，不變色為操作室內達到厭氧環境。
開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理，滅菌時間按具體實驗自定。